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moea_joint_essay 102年 [化學] 定性定量分析、儀器分析

第 1 題

📖 題組:
膠色層分析(又稱膠穿透層析法,分子篩層析法,濾出層析法,Gel filtration)是液相層析法的一種,其操作是將溶劑膨脹過的多孔性高分子材料充填於管柱中,以溶劑沖提(elution),使分子量不同的物質得以分離出來。物質在流出管柱時,收集到的溶劑體積可以下列公式表示: Ve = Vo + Kd × Vi Ve 為收集到的溶劑體積,Vi 是多孔性高分子材料內的孔隙體積,Vo 是管柱中高分子材料以外的空白體積(為一常數),Kd 是物質進入高分子材料孔隙的比率。現在,我們將高分子材料 Sephedex G-75 充填於管柱中,欲分離 Tryptophan (分子量:204)、Ribonuclease (分子量:13000)與 Serum albumin (分子量:75000),請問:
這三種物質流出管柱的先後次序,並說明理由。(10 分)
📝 此題為申論題

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利用膠色層分析的「分子量越大越早流出」原理。因為大分子無法進入孔隙,路徑短;小分子可進入孔隙,路徑長。

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流出管柱的先後次序為:Serum albumin (血清白蛋白) → Ribonuclease (核糖核酸酶) → Tryptophan (色胺酸)。 理由: 膠色層分析(Gel Filtration)主要依據分子的體積(即分子量大小)進行分離。管柱內充填的多孔性高分子材料具有特定大小的孔洞。分子量越大的物質(如分子量 75000 的 Serum albumin),體積越大,無法進入凝膠的孔隙中,僅能從凝膠顆粒外的空隙(Vo)中隨溶劑流出,因此滯留時間最短,最先被洗提出來。相對地,分子量極小的物質(如分子量 204 的 Tryptophan)可以完全進入所有的凝膠孔隙中,流經的路徑最長(Ve = Vo + Vi),滯留時間最久,最後才流出。

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