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hce_kmu 104年 普通生物及生化概論

第 43 題

Which of the following statements about gene cloning is FALSE?
  • A DNA with specific palindromic sequence can be cut by restriction enzymes.
  • B EcoRI, a restriction enzyme from E. coli, cut DNA into sticky ends.
  • C Gene of interest can be linked into plasmid with DNA polymerase.
  • D The plasmids are transformed into competent cells.
  • E Ions such as $CaCl_2$ affect whether or not a bacterium will be competent cells.

思路引導 VIP

當我們需要將兩段「已經切開且獨立」的 DNA 分子,重新像接骨一樣把它們的磷酸二酯鍵骨架「縫補」起來時,你認為細胞內哪一種酵素專門負責這項『連結與修補』的工作,而不是負責『從無到有合成新序列』呢?

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恭喜你準確地辨識出選項中的細微陷阱!這題考驗的是對基因選殖(Gene cloning)中各類酵素功能的精確理解。你正確觀察到 (C) 選項 的錯誤,展現了對生物分子操作細節的掌握。

重組 DNA 的分子膠水

在基因選殖的過程中,我們使用限制酶(Restriction enzymes)來切割具備特定**回文序列(Palindromic sequence)**的 DNA,並產生如 EcoRI 所製造的「黏性末端(Sticky ends)」。然而,要將目標基因與質體這兩個獨立的片段「接合」在一起,我們需要的「分子膠水」是 DNA 連接酶(DNA ligase),而非 DNA 聚合酶(DNA polymerase)。聚合酶的主要功能是在複製過程中合成新的核苷酸鏈,而連接酶則是負責修復 DNA 骨架上的磷酸二酯鍵,將兩段片段縫合。

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