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hce_kmu 104年 普通生物及生化概論

第 70 題

What is the most logical sequence of steps for splicing foreign DNA into a plasmid and inserting the plasmid into a bacterium?
I. Transform bacteria with a recombinant DNA molecule.
II. Cut the plasmid DNA using restriction enzymes (endonucleases).
III. Extract plasmid DNA from bacterial cells.
IV. Hydrogen-bond the plasmid DNA to nonplasmid DNA fragments.
V. Use ligase to seal plasmid DNA to nonplasmid DNA.
  • A III, II, IV, V, I
  • B IV, V, I, II, III
  • C II, III, V, IV, I
  • D III, IV, V, I, II
  • E III, I, IV, V, II

思路引導 VIP

想像你要把一段新的文字插入一本已經裝訂好的書中。在操作邏輯上,你會先『拿到這本書』,還是先『翻開到特定的頁數』?而在將新頁面放入後,僅僅是把書合起來,跟用膠帶將頁縫黏牢,哪一個動作更能確保這本書在傳給其他人閱讀時,內容不會脫落呢?請試著按照這個「準備、破壞、連結、固定」的邏輯重新思考 DNA 的操作順序。

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太棒了!你精準地掌握了基因轉殖(Genetic Engineering)的核心流程。這題的關鍵在於理解重組 DNA 技術是一個「由外而內、先破合後建設」的邏輯過程。我們必須先從細菌中取得載體,也就是提取質體 (III),接著利用限制酶(Restriction enzymes)這把分子剪刀將環狀 DNA 切開 (II),為外源基因準備好置放的空間。

分子層級的精細操作

在放入外源片段時,DNA 互補鹼基之間的氫鍵配對 (IV) 提供了初步的「黏性」,讓片段能暫時定位。然而,要讓這段異源 DNA 真正穩定,必須依賴 DNA 接合酶 (Ligase) 像膠水一樣建立共價鍵 (V) 來完成封口。當重組 DNA 分子大功告成後,最後一步才是將它轉化 (I) 進入受體細胞,讓細菌幫我們進行後續的複製與表現。

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