地特四等申論題
105年
[衛生技術] 生物技術學概要
第 一 題
📖 題組:
SDS-PAGE 常用來分離蛋白質,並決定其分子量,請敘述此實驗製備過程中各個化合物的功用:(每小題 3 分,共 15 分) (一) SDS (二) Ammonium persulfate (三) TEMED (四) Glycine (五) Bis-acrylamide
SDS-PAGE 常用來分離蛋白質,並決定其分子量,請敘述此實驗製備過程中各個化合物的功用:(每小題 3 分,共 15 分) (一) SDS (二) Ammonium persulfate (三) TEMED (四) Glycine (五) Bis-acrylamide
📝 此題為申論題,共 5 小題
小題 (一)
SDS
思路引導 VIP
看到 SDS-PAGE 中的 SDS,首先要想到它是一種強效的陰離子界面活性劑。答題時務必寫出它的兩大核心作用:「使蛋白質變性(破壞立體結構使其線性化)」以及「賦予蛋白質均勻的負電荷」,進而讓蛋白質在電泳時僅以分子量大小作為分離依據。
小題 (二)
Ammonium persulfate
思路引導 VIP
看到 Ammonium persulfate (APS),應立刻聯想其在「凝膠聚合反應」中扮演的「起始劑」角色。答題時需點出它能產生自由基,並引發 acrylamide 單體進行聚合反應的機制。
小題 (三)
TEMED
思路引導 VIP
看到 TEMED,應立刻聯想到它與 APS(過硫酸銨)在凝膠聚合反應中的搭配關係。作答時需明確點出其「催化劑」的角色,並說明它如何促使自由基產生進而引發聚合反應。
小題 (四)
Glycine
思路引導 VIP
看到 Glycine 應聯想到不連續電泳系統的緩衝液成分。解題關鍵在於指出它作為「尾隨離子(Trailing ion)」,利用兩性胺基酸在不同 pH 值下的帶電特性,在濃縮膠中協助蛋白質產生「濃縮效應(Stacking effect)」。
小題 (五)
Bis-acrylamide
思路引導 VIP
看到「Bis-acrylamide」,應聯想其在聚丙烯醯胺凝膠(PAGE)製備中的結構角色。它是一種交聯劑,能將線性的丙烯醯胺聚合物連接成三維網狀結構,進而決定膠體的孔隙大小。