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高考申論題 105年 [生物技術] 微生物學

第 一 題

📖 題組:
以下為遺傳工程技術中所使用的載體(vector),請敘述其具有何種特性?
📝 此題為申論題,共 4 小題

小題 (一)

TA 選殖載體(TA cloning vector)(3 分)

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作答本題時,首先回想 Taq DNA 聚合酶在 PCR 擴增時會於產物 3' 端加上單一腺嘌呤(A)的特性。接著說明載體如何配合設計(3' 突出 T),最後總結其不需限制酶切割即可直接選殖的實務優勢。

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【破題】 TA 選殖載體(TA cloning vector)是一種專為快速選殖聚合酶連鎖反應(PCR)產物而設計的線性化質體載體,其核心在利用單一鹼基的互補性完成核酸片段的連接。 【論述】

小題 (二)

Phagemid 載體(3 分)

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看到 Phagemid,應立刻聯想到字根「Phage(噬菌體)+ mid(質體)」的嵌合體。答題時需精準點出其雙重 DNA 序列元件(如 f1 ori 與質體 ori),說明依賴輔助噬菌體(Helper phage)蛋白質產物來切換雙股/單股複製的機制,最後連結至其在定序、定點突變及噬菌體展示技術上的應用優勢。

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【破題】 Phagemid(噬菌質體)是一種結合質體(Plasmid)與絲狀噬菌體(Filamentous phage,如 M13 或 f1)特性的嵌合載體,兼具兩者的優勢。 【論述】

小題 (三)

穿梭載體(Shuttle vector)(2 分)

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看到「穿梭載體(Shuttle vector)」,首要聯想其「能在兩種不同宿主間轉移並複製」的核心特性。解題時應具體列出其必備的DNA元件(兩套複製起始點、兩套選擇性標記)以及對應的蛋白質產物,並點出此設計在遺傳工程中「易於建構與後續表現」的優勢。

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「穿梭載體(Shuttle vector)」係指一種能夠在兩種不同宿主物種(如原核生物大腸桿菌與真核生物酵母菌或哺乳類細胞)中穩定存活並複製的人造質體載體。 其核心特性與作用機制如下: (1) 雙宿主專一性之 DNA 序列與對應蛋白質:

小題 (四)

酵母菌人工染色體載體 YAC(yeast artificial chromosome)(2 分)

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看到YAC(酵母菌人工染色體),首先要聯想它模擬真核染色體所需的三大核心DNA元件(ARS、CEN、TEL)。接著,切入這些序列元件如何與複製及分裂蛋白互動的機制,最後導出其『能乘載超大片段DNA(100-1000 kb)』於遺傳工程上的核心優勢。

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【破題】酵母菌人工染色體(Yeast Artificial Chromosome, YAC)是一種利用真核細胞(酵母菌)染色體結構特徵所設計的高容量選殖載體,專門用於構築大型基因組資料庫。 【論述】 一、核心 DNA 序列元件與對應蛋白質

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