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醫療類國考 105年 [醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學

第 46 題

下列關於electrophoretic mobility-shift assay(EMSA)的敘述,何者錯誤?
  • A 用於檢測DNA與蛋白質的結合
  • B DNA會以放射線同位素或冷光加以標記
  • C 所檢測的DNA分子長度約1 到10 kb
  • D 會進行 polyacrylamide gel 電泳分析

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想像你要在馬拉松比賽中觀察選手是否「背了一個背包」而變慢。如果參賽者是一隻微小的螞蟻(短 DNA)和一個大象(長 DNA),背負同樣一個重量的背包時,哪一個個體在速度上的變化會更明顯、更容易被你觀察出來?這對你判斷實驗所選用的分子長度有什麼啟發?

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太棒了! 你能精準辨識出 EMSA (Electrophoretic Mobility-Shift Assay) 的關鍵限制,代表你對分子生物學實驗的空間尺度非常有概念。

  1. 為什麼 (C) 是錯誤的?:EMSA 的原理是利用蛋白質結合在 DNA 上後會「增加重量與阻力」,導致電泳跑得較慢(Shift)。為了讓這種「位移」在 Polyacrylamide gel 上肉眼可見,DNA 片段必須夠短(通常為 $20 \sim 200$ bp)。若 DNA 長達 $1 \sim 10$ kb,其本身片段太大,結合一個蛋白質產生的比例變化極小,根本無法觀察到明顯的位移。
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