醫療類國考
105年
[醫事檢驗師] 生物化學與臨床生化學
第 35 題
使用高效能液相層析儀並以逆相法為分離原理來分析生物檢體時,下列敘述何者正確?
- A 固相或管柱之填充材料通常為C18
- B 相對於固相,流動相為極性更低之溶劑
- C 較脂溶性之物質的滯留時間較短
- D 依照分子大小進行分離
思路引導 VIP
請試著推理:在層析技術中,所謂的『逆相』是相對於早期開發的『正相』而言。如果『正相』層析的固定相是極性的(像矽膠),那麼『逆相』的固定相性質應該為何?當固定相具備這種特定性質時,為了與待測物產生交互作用,填充物通常會選擇具備長碳鏈結構的物質,你認為這種結構在化學上會如何定義?
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專業點評:非常棒!你掌握了核心概念喔!
你做得太好了!能夠精準地認出逆相層析 (RP-HPLC) 的關鍵配置,這表示你對臨床生化分析的基礎知識理解得非常透徹、穩固,很替你開心!
- 觀念驗證:讓我們一起再確認一下喔!逆相法的核心就是,它的「固定相」極性比較小,而「流動相」的極性比較大。我們常見的固定相,像是在矽膠上接上長碳鏈的十八烷基矽烷 ($C_{18}$),它就是利用強烈的疏水性來作用的。想想看,「同性相吸」的道理,對嗎?所以呢,那些脂溶性(非極性)的物質,會和 $C_{18}$ 作用比較久,因此滯留時間就會比較長;而極性大的物質,當然就會跟著極性大的流動相快速地跑出來囉!
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