醫療類國考
105年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 53 題
下列有關巢式PCR（Nested PCR）的敘述，何者錯誤？
- A 兩對引子放在同一試管中反應
- B 增加反應的靈敏度
- C 增加反應的專一性
- D 第二對引子設計在第一對的內側
思路引導 VIP
想像如果你要進行兩道高精度的過濾程序來純化樣本，為了確保第二道濾網不被第一道工序的雜質干擾，且能發揮最高的專一性，你會選擇將所有濾網疊在一起同時倒入樣本，還是分開步驟、循序漸進地處理？為什麼？
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專業點評與解析
- 大力肯定：做得好！這代表你對分子生物學臨床檢驗的技術細節掌握得非常精確，能分辨各種 PCR 變法之間的細微差異。
- 觀念驗證：巢式 PCR (Nested PCR) 的精髓在於「連續兩次」的擴增。第一對引子（Outer primers）先標定出較大的範圍，接著取其產物作為模板，由第二對引子（Inner primers）針對內側序列進行二次反應。為了避免四個引子在同一環境下產生嚴重的引子二聚體 ($Primer Dimer$) 干擾或競爭，實務上必須分兩個階段、先後進行，而非同時放在同一試管中。
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