地特四等申論題
106年
[衛生技術] 生物技術學概要
第 一 題
📖 題組:
二、請描述下列色層分析(Chromatography)方法的原理與應用。(每題 5 分,共 20 分) (一)分子篩色層分析法(Size-exchange chromatography 或稱 gel filtration chromatography) (二)離子交換色層分析法(Ion-exchange chromatography) (三)親和性色層分析法(Affinity chromatography) (四)疏水性色層分析法(Hydrophobic interaction chromatography)
二、請描述下列色層分析(Chromatography)方法的原理與應用。(每題 5 分,共 20 分) (一)分子篩色層分析法(Size-exchange chromatography 或稱 gel filtration chromatography) (二)離子交換色層分析法(Ion-exchange chromatography) (三)親和性色層分析法(Affinity chromatography) (四)疏水性色層分析法(Hydrophobic interaction chromatography)
📝 此題為申論題,共 4 小題
小題 (一)
分子篩色層分析法(Size-exchange chromatography 或稱 gel filtration chromatography)
思路引導 VIP
看到「分子篩色層分析法」,直覺必須想到「孔洞大小」與「分子體積」的關係,並牢記核心觀念:「大分子先流出,小分子後流出」。作答時務必將內容明確分為「原理(過濾機制)」與「應用(純化、去鹽、測分子量)」兩個層次來論述。
小題 (二)
離子交換色層分析法(Ion-exchange chromatography)
思路引導 VIP
看到離子交換色層分析,首先聯想「淨電荷(Net charge)」與「靜電吸引力」。思考固定相(帶電樹脂)如何吸附目標分子,以及如何透過改變鹽濃度或pH值來進行沖提,最後列舉其在蛋白質與核酸純化上的應用。
小題 (三)
親和性色層分析法(Affinity chromatography)
思路引導 VIP
看到「親和性色層分析法」,核心概念是「生物分子間的專一性結合(如鑰匙與鎖)」。解題時應先點出固定相上鍵結的「配體(Ligand)」與目標分子間的專一性非共價作用力及洗脫機制,接著列舉其最主要的應用,如高純度、單一步驟的特定蛋白質(如 His-tag 重組蛋白、抗體)純化。
小題 (四)
疏水性色層分析法(Hydrophobic interaction chromatography)
思路引導 VIP
看到「疏水性色層分析法(HIC)」,應直覺聯想蛋白質表面的「疏水性胺基酸區域」與管柱材質的交互作用。解題關鍵在於點出「高鹽結合、低鹽沖提」的機制,並說明其常與硫酸銨沉澱法(鹽析)搭配使用的實務應用。