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普考申論題 106年 [衛生技術] 生物技術學概要

第 一 題

一、請敘述利用限制酶切割後,再以 PCR 檢測甲基化 DNA 之原理。(20 分)
📝 此題為申論題

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看到此題,應立刻聯想到「甲基化敏感性限制酶 PCR(MSRE-PCR)」技術。解題脈絡應包含三層次:首先指出特定限制酶對甲基化位點「切不下去」的特性;其次按步驟說明切割後進行 PCR(變性、黏合、延伸)的結果推導(有產物代表已甲基化,無產物代表未甲基化);最後列舉該技術在臨床或科研上的實務應用。

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【破題】 本題所述技術為「甲基化敏感性限制酶聚合酶連鎖反應(Methylation-Sensitive Restriction Enzyme PCR, MSRE-PCR)」。此技術利用特定限制酶對 DNA 甲基化狀態的敏感度差異,結合 PCR 的高靈敏度放大特性,來檢測特定基因啟動子區(Promoter)之 CpG 島(CpG islands)是否發生去氧胞嘧啶(Cytosine)的甲基化修飾。 【論述】

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