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高考申論題 106年 [生物技術] 生物化學

第 一 題

📖 題組:
四、說明下列純化蛋白質的原理及應用:(每小題 5 分,共 10 分) (一) Gel filtration (二) Metal chelate affinity chromatography
📝 此題為申論題,共 2 小題

小題 (一)

Gel filtration

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看到「Gel filtration(膠體過濾層析)」應直覺聯想到「分子篩(Size-exclusion)」,核心概念是利用「分子大小(流體動力學半徑)」作為分離依據。答題時需切分「原理(大分子先出、小分子後出)」與「應用(純化、脫鹽、測分子量)」兩個層次進行論述,以確保完整拿分。

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【破題】Gel filtration(膠體過濾層析),又稱分子篩層析(Size-exclusion chromatography, SEC),是一種利用蛋白質分子大小與形狀差異(流體動力學半徑)進行分離的純化技術。 【論述】 一、純化原理

小題 (二)

Metal chelate affinity chromatography

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看到「金屬螯合親和層析(IMAC)」,首先要連結到化學上的「配位共價鍵」原理:過渡金屬離子(如 Ni2+)與組胺酸(Histidine)側鏈咪唑環的結合。接著,思考其在生技產業最普遍的應用,即利用基因工程技術加上 6xHis-tag 進行重組蛋白質的高效純化,並說明其結合與洗脫(競爭性或pH改變)的化學機制。

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【破題】 金屬螯合親和層析(Immobilized Metal Affinity Chromatography, IMAC)是一種利用過渡金屬離子與蛋白質特定胺基酸側鏈間的「配位共價鍵(Coordinate covalent bond)」作用力,來分離與純化蛋白質的層析技術。 【論述】

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