高考申論題
106年
[衛生技術] 生物技術學
第 二 題
二、請說明次世代定序利用乳化 PCR（emulsion PCR）及焦磷酸定序法（pyrosequencing）之原理。（20 分）
📝 此題為申論題
思路引導 VIP
看到此題，應立即聯想到這是早期次世代定序（NGS）如 Roche 454 系統的核心技術。解題需分兩層次：首先拆解『Emulsion PCR』如何透過油包水微滴實現單一分子擴增（Clonal amplification）；其次詳述『Pyrosequencing』邊合成邊定序（Sequencing by synthesis）的四步酵素級聯反應（DNA polymerase, ATP sulfurylase, luciferase, apyrase）。最後補充該技術在同聚物（Homopolymer）判讀上的優缺點以獲取高分。
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【破題】 乳化 PCR（Emulsion PCR）與焦磷酸定序法（Pyrosequencing）為早期次世代定序（Next-Generation Sequencing, NGS，如 Roche 454 平台）的核心技術組合，旨在實現高通量、單一分子純系擴增（Clonal amplification）與即時發光定序。 【論述】
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