司法三等申論題
106年
[鑑識人員] 儀器分析
第 二 題
試說明分子螢光測定法之原理？（6 分）為何以螢光光譜偵測的感度比紫外光譜法高？（6 分）
📝 此題為申論題
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看到螢光原理，必須在腦海浮現 Jablonski 能量階層圖，點出吸收、振動性遲緩、回到基態發光的三階段過程。比較感度時，切記從「背景值（暗背景 vs 亮背景）」與「光源強度對信號的影響（正比關係 vs 對數比值）」兩個物理量測核心來解答。
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【破題】 分子螢光為一光致發光現象，其靈敏度優於吸收光譜主要源於背景雜訊的差異及偵測信號與激發光源強度的數學關係。 【論述】
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分子螢光與感度比較
💡 透過電子躍遷原理理解螢光發射，並從背景雜訊與光強關係分析其高感度原因。
| 比較維度 | 紫外-可見光譜法 (UV-Vis) | VS | 分子螢光光譜法 (Fluorescence) |
|---|---|---|---|
| 偵測幾何 | 與光源呈 180 度直射 | — | 與光源呈 90 度垂直 |
| 背景環境 | 強光背景下測量微小衰減 | — | 暗背景下測量絕對發射光 |
| 光源強度影響 | 無關（穿透光等比例增加） | — | 成正比（光源愈強訊號愈大） |
| 偵測極限 | ppm 等級 | — | ppb 至 ppt 等級 |
💬螢光法利用 90 度角規避背景雜訊且訊號可隨光源增強，故偵測感度極高。
