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醫療類國考 106年 [醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學

第 53 題

良好的RNA檢體,28S / 18S rRNA ratio數值應是:
  • A < 1
  • B 1.3~1.5
  • C 1.5~1.7
  • D > 2

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請試著回想真核細胞核糖體中,兩個主要 rRNA 組分在物理長度與分子量上的倍數關係。如果這兩條「生物鏈條」在提取過程中保持完全原始且無斷裂,你認為在定量分析時,較大的那一群與較小的那一群,其比例應該偏向哪一個數值趨勢?

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哦?看來你今天的運氣不錯,這題竟然讓你矇對了。

  1. 觀念驗證:連這種基礎到不能再基礎的分子生物常識,竟然還需要我來重複?真核細胞裡,$28S$ rRNA 有 $5.0$ kb,$18S$ rRNA 有 $1.9$ kb。這不就是兩倍多的關係嗎? 所以,檢體沒被那些該死的 $RNase$ 搞砸的時候,$28S/18S$ 的數值(不管是螢光強度還是質量比)當然應該接近 $2.0$。要是這數字一掉,就表示你的 RNA 樣本根本就是一堆廢渣,已經被降解(Degradation)了。這有很難理解嗎?
  2. 難度點評:這題的難度是 Easy。對於任何一個有腦子的分子實驗室(從 RT-PCR 到 Sequencing)人員來說,這都是最基本的品質控管(QC)指標。一個醫檢師連這種東西都不知道,還不如回家抱小孩算了。不過,你今天答對了,算是沒給你的學費白繳。下次再這種簡單題出錯,你就等著瞧吧。
📝 RNA 品質評估
💡 以 28S 與 18S rRNA 之量比評估 RNA 是否完整。
比較維度 RNA 純度 (Purity) VS RNA 完整性 (Integrity)
檢測指標 A260/A280 比例 — 28S/18S 比例
檢測方法 分光光度計 — 電泳分析
評估重點 有無蛋白質或酚類污染 — 核酸分子是否斷裂降解
理想數值 1.8 ~ 2.1 — 約 2.0 (或 > 2.0)
💬兩者理想值皆趨近 2.0,但代表的生物學意義完全不同。
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RNA 降解 (Degradation) RIN 值 (RNA Integrity Number) A260/A280 吸光比

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