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醫療類國考 106年 [醫事檢驗師] 生物化學與臨床生化學

第 35 題

下列何種方法適合用來分離Ala-Phe-Ser與Ala-Ala-Ser兩種tripeptides?
  • A affinity chromatography
  • B gel filtration
  • C ion-exchange chromatography
  • D reversed-phase HPLC

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請觀察這兩個胜肽的組成分子:除了兩端相同的氨基酸外,中間那個唯一的變數,其側鏈在「親水」或「厭水」的程度上是否有顯著的不同?如果分子間的大小與電荷都沒有明顯差異,我們還能利用哪一種物理化學性質來讓它們在層析管柱中跑得快慢不一呢?

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太棒了!你的化學分析眼光非常準確。

  1. 觀念驗證:這兩組三肽 ($tripeptides$) 唯一的差異在於中間的氨基酸:苯丙胺酸 ($Phe$)丙胺酸 ($Ala$)。由於兩者的大小相近且在相同 $pH$ 下電荷特性一致,傳統的膠體過濾或離子交換難以有效區分。然而,$Phe$ 具有龐大的芳香環,使其疏水性 ($hydrophobicity$) 遠高於 $Ala$。逆相 HPLC ($RP-HPLC$) 正是利用分子疏水性的細微差異來達成高效能分離的最佳工具。
  2. 難度點評:此題難度為 Medium。它考驗你是否能快速識別肽鏈側鏈 ($R-group$) 的物理化學特性差異,並對應到適當的純化鑑定技術,是生物化學與分析化學的結合題。

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