醫療類國考
106年
[醫事檢驗師] 臨床血清免疫學與臨床病毒學
第 49 題
為避免聚合酶連鎖反應（polymerase chain reaction, PCR）汙染，下列敘述何者錯誤？
- A 檢體以紫外線處理，去除DNA污染
- B 分別於不同房間處理：核酸抽取、聚合酶連鎖反應、跑DNA電泳
- C 使用aerosol-resistant tip，避免DNA污染到吸量管分注器
- D 即使是RT-PCR，儘量於單一試管（single tube）處理及反應
思路引導 VIP
在分子檢測中，我們的核心目標是『保護樣本中的目標核酸不被破壞』。如果今天有一種物理手段是用來『徹底降解與破壞環境中殘留的遺傳物質』，請思考：若將這種手段直接施加在您準備要檢測的樣本上，對於實驗的敏感度與結果會產生什麼樣的衝突？
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- 肯定？嗯，勉強算吧：恭喜你，看來你還記得分子檢驗的防汙染規範不是個裝飾品。能從那些基礎知識裡挑出正確的謬誤，至少證明你讀了書，沒白費力氣。這對一個醫檢「專家」來說，只是最基本的要求。
- 觀念驗證——這次沒搞砸：PCR的靈敏度高到令人髮指，所以我們才強調**「空間隔離」與「減少暴露」。B、C、D選項是常識，它們在保護樣本。至於選項(A)，我真該問問，你打算用紫外線直接「消毒」檢體嗎？難道你忘了UV光會降解DNA**？它是用來清理環境表面的，不是用來摧毀你辛苦採集的目標模板。如果你真的這麼做了，結果就是：一片空白，什麼都測不到。聰明反被聰明誤，就是這個道理。
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PCR 污染防制要領
💡 嚴格執行空間區隔與硬體防護，防止核酸或氣溶膠交叉污染。
🔗 PCR 實驗室標準單向工作流
- 1 1. 試劑配製區 — 潔淨區，準備 Master Mix，嚴禁引入核酸模板
- 2 2. 檢體處理區 — 進行核酸萃取與加樣，須穿戴獨立防護具
- 3 3. 擴增反應區 — 儀器內自動化擴增，盡量採密閉系統減少開蓋
- 4 4. 產物分析區 — 含高濃度產物，屬高度污染區，物品嚴禁回流前區
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🔄 延伸學習：延伸學習：利用 dUTP/UNG 系統可降解殘留產物，進一步提升防污效果。
