地特四等申論題
107年
[衛生技術] 生物技術學概要
第 二 題
二、相較於一般的 PCR 檢測方法，請列舉兩例以恆溫核酸放大（isothermal nucleic acid amplification）為基礎的檢測方法及原理。（20 分）
📝 此題為申論題
思路引導 VIP
看到「恆溫核酸放大」，首先應點出其與傳統 PCR 的最大差異（不需熱循環儀，恆定溫度下利用具鏈置換活性的酵素解開雙股DNA）。接著精挑兩個最具代表性的技術（如 LAMP 與 RPA），結構化地列出其中英文全名、所需核心酵素與反應原理，最後可帶入其在床邊檢測（POCT）的應用價值以獲取高分。
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【破題】一般聚合酶連鎖反應（PCR）需依賴熱循環儀進行升降溫（變性、黏合、延伸），而「恆溫核酸放大技術」（Isothermal nucleic acid amplification）則能在單一恆定溫度下進行，主要依賴具「鏈置換（Strand displacement）」活性的 DNA 聚合酶或輔助蛋白來解開雙股 DNA，具備反應快速、不需昂貴儀器等優勢，極適合用於床邊檢測（POCT）。 【論述】 一、實例一：環狀等溫核酸增幅法（Loop-mediated isothermal amplification, LAMP）
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恆溫核酸放大技術
💡 利用酵素取代物理升降溫進行 DNA 擴增，具快速、簡便、POCT 優點。
| 比較維度 | PCR (聚合酶連鎖反應) | VS | 恆溫放大 (LAMP/RPA) |
|---|---|---|---|
| 變性/解鏈方式 | 95°C 高溫物理變性 | — | 酵素鏈置換/重組酶 |
| 儀器需求 | 精密熱循環儀 | — | 簡易恆溫器或不需 |
| 反應速度 | 較慢 (需循環升降溫) | — | 極快 (15-60分鐘) |
| 引子複雜度 | 簡單 (一對引子) | — | 複雜 (LAMP需4-6條) |
💬恆溫技術突破儀器限制，極適合傳染病快速篩檢與資源匱乏地區使用。
