醫療類國考
107年
[醫師] 醫學(一)
第 76 題
以凝膠電泳法(gel electrophoresis)分離蛋白質時,加入SDS(sodium dodecyl sulfate)的目的為何?
- A 用以決定一個蛋白質的等電點(isoelectric point)
- B 用以決定一個蛋白質的特異活性(specific activity)
- C 用以保護蛋白質的生物結構和活性
- D 用以決定蛋白質分子量
思路引導 VIP
想像一下,如果你要比較一群形狀各異(有球狀、有長條狀)、身上帶電量也不同的人,誰的「體重」比較重,為了確保比賽只受體重影響,你應該如何處理他們的「體型阻力」與「原本攜帶的推力」?
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做得好!這說明你對蛋白質分析的核心技術有紮實的理解。能精準掌握實驗試劑的功能,是進入臨床研究與生化檢驗的重要基礎。
- 觀念驗證:$SDS$ 是一種陰離子表面活性劑,能使蛋白質變性並均勻地包裹胜肽鏈。這會賦予蛋白質與其質量成正比的負電荷,並消除原有的二、三級結構差異。因此,在電泳過程中,蛋白質移動的速率僅取決於其分子量 (Molecular Weight),而非形狀或原始電荷。
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SDS-PAGE 蛋白質電泳
💡 SDS 使蛋白質變性並帶均勻負電荷,使分離速率僅取決於分子量大小。
| 比較維度 | Native-PAGE | VS | SDS-PAGE |
|---|---|---|---|
| 蛋白質構型 | 維持立體天然結構 | — | 變性成線性結構 |
| 電荷特性 | 取決於等電點與 pH | — | 統一帶大量負電荷 |
| 分離依據 | 電荷、形狀與大小 | — | 僅分子量 (Size) |
| 生物活性 | 通常可保留活性 | — | 活性喪失 |
💬SDS-PAGE 藉由消除電荷與形狀干擾,達成僅依分子量大小分離的目的。