調查局三等申論題
108年
[醫學鑑識組] 分子生物學
第 三 題
三、解釋甲基 PCR（methylation PCR）技術。說明其實驗原理、主要實驗步驟及實驗結果之判讀方式。（20 分）
📝 此題為申論題
思路引導 VIP
看到「甲基化 PCR（MSP）」，首先要聯想到核心化學反應——「亞硫酸氫鈉（Bisulfite）轉化」，這是區分甲基化與非甲基化胞嘧啶（Cytosine）的關鍵。接著，依序從「DNA處理、引子設計、PCR擴增到電泳判讀」建立完整的邏輯鏈，並強調專一性引子如何決定最終的擴增結果，答題時務必精準使用化學修飾與分子學名詞。
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【重點】考查表觀遺傳學中 DNA 甲基化檢測的核心技術機制，強調化學修飾轉化為序列差異的邏輯推導。 【解析】 甲基化特異性 PCR（Methylation-specific PCR, MSP）是一種用於檢測特定基因啟動子（Promoter）區域 CpG 島（CpG islands）DNA 甲基化狀態的分子生物學技術。其主要內容如下：
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甲基化專一性 PCR
💡 透過亞硫酸氫鈉將表觀修飾轉為序列差異，並以專一引子鑑定甲基化。
🔗 MSP 技術執行邏輯鏈
- 1 亞硫酸氫鈉處理 — 非甲基化 C 轉為 U，甲基化 5-mC 結構保護不變。
- 2 專一性引子結合 — M 引子結合保留 C 序列，U 引子結合 C 轉 T 序列。
- 3 PCR 擴增與電泳 — 根據 M/U 反應管是否出現條帶判別 DNA 修飾狀態。
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🔄 延伸學習：延伸學習：了解該技術如何偵測癌症中抑癌基因的甲基化程度。
