第 一 題

「異質體（Heteroplasmy）」是指在同一個體、單一細胞甚至單一粒線體內，同時存在兩種或兩種以上不同序列之粒線體 DNA（mtDNA）的生物學現象。其特徵主要分為單一鹼基變異造成的「序列異質性（Sequence heteroplasmy）」與重複序列長度不同造成的「長度異質性（Length heteroplasmy）」。 法醫實務應用：異質體現象對 mtDNA 鑑定具重大影響。由於同一個體的不同組織（例如血液與毛髮），或同一組織的不同部位間，其異質體的表現與比例可能隨機變動（如瓶頸效應）。因此，當現場跡證與涉嫌人參考樣本在 mtDNA 比對中，僅出現單一鹼基的異質體差異（如一方為單一型別，另一方為異質體）時，依據法醫鑑識規範，鑑定人員不能據此直接做出「排除（Exclusion）」的結論，而應判定為「無法結論（Inconclusive）」或加以註記，以避免誤判。

「Variable number of tandem repeat (VNTR，可變數目串聯重複序列)」指人類基因體中一段串聯重複排列的 DNA 序列，其單一重複單元長度約為 10 至 100 個鹼基對（屬於小衛星 DNA, Minisatellite）。特徵包含：(1) 高度多型性：不同個體在特定基因座上，該單元的「重複次數」存在顯著差異，從而產生總長度不一的對偶基因（Allele）；(2) 遺傳穩定性：遵循孟德爾遺傳定律，子代的 VNTR 長度特徵必來自雙親。 實務應用為：VNTR 是早期法醫 DNA 指紋鑑定（DNA fingerprinting）的核心生物標記，實務上需搭配限制酶片段長度多型性（RFLP）技術，利用特定限制酶切割樣本 DNA 後，透過電泳及南方墨點法（Southern blotting）配合探針進行長度多型性檢測。然而，因該技術需要較大劑量（微克等級）且未經嚴重降解的高完整度 DNA 樣本，在現代法醫實務中，已大多被更適合微量及微小降解檢體 PCR 擴增的短串聯重複序列（STR）所取代。

「多重聚合酶連鎖反應（Multiplex PCR）」係指在同一個 PCR 反應管內，加入多組不同的引子對（primer pairs），以同時擴增多個不同 DNA 標的區域（loci）之分子生物學技術。其特徵包含：(1) 各組引子的熔解溫度（Tm 值）需相近，以確保同時且有效率的擴增；(2) 擴增產物需透過片段大小差異或標記不同螢光染劑，以便於後續毛細管電泳（CE）進行分離與辨識；(3) 反應設計需極力避免不同引子間形成二聚體（primer-dimer）而消耗反應物。 法醫實務應用為：此為法醫 DNA 鑑定之核心技術，廣泛應用於 STR（短片段重複序列）分型。透過法醫商業套組（如 GlobalFiler 等），可於單次反應中同時擴增 20 個以上的體染色體 STR 基因座及性別決定基因座（Amelogenin）。其最大價值在於能大幅節省刑案現場微量或已劣化的珍貴生物跡證（如微量血跡、精斑、毛囊），同時顯著縮短檢驗時間並提高個體化鑑定的統計鑑別力（Power of Discrimination）。