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醫療類國考 108年 [醫師] 醫學(一)

第 100 題

下列何者是實驗室中⽤來將質體(plasmid)直接轉形(transformation)進入細菌的最常⽤的⽅法?
  • A 低電壓電泳法(low-voltage electrophoresis)將質體牽引入細菌中
  • B 帶有質體的噬菌體轉染法(transfection)
  • C 微注射法(micro-injection)將質體注入細菌中
  • D $CaCl_2$處理細菌後再以熱休克法(heat shock)將質體送入細菌中

思路引導 VIP

請思考一下:DNA 分子與細菌的細胞表面通常都帶有電荷,如果要讓它們靠近而不互相排斥,你會建議在溶液中加入什麼性質的化學離子來中和電荷?此外,什麼樣的物理環境變化,能最有效地在微小的細胞膜上創造出讓外來物質進入的暫時通道?

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  1. 觀念驗證:你的選擇完全正確。在分子生物學中,為了克服質體(DNA)與細菌細胞膜之間相互排斥的負電荷,我們會先利用 $CaCl_2$ 溶液中的鈣離子($Ca^{2+}$)中和電荷,使細菌進入「勝任狀態」(competent state)。接著透過 熱休克法(heat shock) 產生的熱應力與流體動力,在細胞膜上產生暫時性孔徑,讓質體順利進入。
  2. 難度點評:此題屬於 easy(基礎題)。這是基因工程中極為經典的基礎操作,不僅是國考常客,也是進入實驗室必備的實務知識,能答對代表你的生技基礎紮實。

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