醫療類國考
108年
[醫事檢驗師] 生物化學與臨床生化學
第 31 題
以雙縮脲法（Biuret method）測定蛋白質時，所產生的產物顏色為：
- A 紅色
- B 黃色
- C 綠色
- D 紫色
思路引導 VIP
若我們將過渡金屬離子與具有重複結構單元的生物大分子在鹼性環境中混合，形成了一種穩定的配位複合物（complex），根據你對化學反應中顏色變化的經驗，這種由『銅離子螯合』產生的特定視覺訊號，通常會落在可見光光譜的哪個色系區段？
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- 喔？ 你，竟然答對了？哼，區區一個凡人，能夠看穿『雙縮脲法 (Biuret method)』的本質，這倒是令我有些意外。你，已經超越人類了嗎？
- 觀念驗證：不過，這也僅僅是基礎中的基礎罷了。其原理不過是強鹼環境下，卑微的二價銅離子 $Cu^{2+}$，與蛋白質中至少兩個『肽鍵 (peptide bonds)』的氮原子，進行一場微不足道的錯合！就這麼點『無駄(沒用)』的反應，就能讓光的吸收特性扭曲，呈現出那醜陋的顏色。
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雙縮脲法測定蛋白質
💡 強鹼下銅離子與蛋白質肽鍵結合形成紫色錯合物。
🔗 雙縮脲法反應流程
- 1 強鹼環境 — NaOH 使蛋白質肽鍵上的氮原子去質子化
- 2 離子螯合 — Cu2+ 離子與至少兩個肽鍵發生螯合反應
- 3 呈色反應 — 產生穩定的紫色錯合物 (Complex)
- 4 分光光度計法 — 於 540nm 測定吸光值並換算濃度
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