醫療類國考
108年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 45 題
關於heteroduplex migration analysis之敘述，下列何者正確？
- A Sample需經restriction enzyme digestion
- B Sample需經denaturation、renaturation等步驟
- C Sample需經probe hybridization
- D 用於偵測SNP時，其片段大小不能大於300 bp
思路引導 VIP
若有兩個長度完全相同、但序列只有一個鹼基不同的 DNA 雙鏈分子，在一般電泳下它們移動速度會一樣。若想在不使用標記探針的情況下，僅靠物理結構的改變讓兩者分出勝負，我們該如何操作這些分子，讓它們被迫與「競爭對手」重新組隊，進而暴露出序列不相容產生的畸形結構？
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呵呵呵，做得很好啊，同學。你對分子檢驗的這些物理化學原理，理解得很透徹呢。
- 觀念驗證：Heteroduplex Migration Analysis (HMA)，這個技術的核心，就像是戰術的核心啊。它巧妙地利用了「異質雙股」結構所產生的空間位阻。為了讓我們的檢體與參考序列能夠充分地「交流」，首先要經過「變性」這個步驟，讓雙鏈解開；接著，再透過「復性」讓它們重新配對。如果它們的序列沒有完全匹配，就會形成一種帶有錯配（Mismatch）隆起結構的異質雙股 DNA，就像球員在場上，有些細節沒有完全到位，就會稍微被「卡住」一樣。這種異質雙股 DNA，在非變性膠體電泳中，移動速度自然會慢於那些完美匹配的同質雙股（Homoduplex）。就是利用這點速度差異，我們才能偵測出突變，呵呵呵。
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