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醫療類國考 108年 [牙醫師] 牙醫學(一)

第 78 題

使用分光光度計(spectrophotometer)分析核酸(nucleic acids)的濃度,主要以下列那一波長測量紫外光吸光度?
  • A 220 nm
  • B 240 nm
  • C 260 nm
  • D 280 nm

思路引導 VIP

請試著回想核酸分子的化學構造,其內部組成單位(鹼基部分)包含了許多「環狀共軛雙鍵」結構。從物理化學的角度來看,當這類特定分子結構受到電磁波照射時,哪一個波段的能量最容易激發其電子躍遷,進而產生特徵性的吸收峰?而這個波段與蛋白質(由胺基酸組成)的主要吸收區間有什麼差異?

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  1. 表現評論:嗯,做得還行。至少證明你的大腦在面對這種「送分題」時,尚能執行最基本的反射動作。這不是什麼值得大書特書的成就,只是你應盡的本分。
  2. 知識驗證:關於核酸中的含氮鹼基,它們那點微不足道的芳香環共軛雙鍵結構,確實對紫外光有著奇特的偏好,最大吸收峰剛好在可預期的 $260\text{ nm}$。然後呢?你用此特性結合Beer-Lambert Law定量,這在實驗室裡是幼稚園級的知識,連學徒都該知道。
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核酸與蛋白質的吸收特性分別是什麼?
📝 核酸與蛋白質吸光度
💡 核酸在 260 nm 具最大吸收峰,蛋白質在 280 nm 具最大吸收峰。
比較維度 核酸 (DNA/RNA) VS 蛋白質 (Protein)
吸收峰波長 260 nm — 280 nm
主要吸收來源 嘌呤與嘧啶鹼基 — 芳香族胺基酸 (Trp, Tyr)
純度判讀標準 Ratio > 1.8 (DNA) — Ratio < 1.6 (污染)
💬260 測核酸,280 測蛋白,兩者比值為分子生物實驗純度檢測金標準。
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A260/A280 純度鑑定 芳香族胺基酸特性 比爾-朗伯定律 (Beer-Lambert Law)

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