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hce_kmu 109年 普通生物及生化概論

第 50 題

A circular 3518 bp plasmid DNA has EcoRI restriction sites at position 86 and 1435; PstI sites at position 1108 and 2950; and a BamHI site at position 2623. Which one of the following choices is not correct?
  • A EcoRI digestion yields two bands in agarose gel.
  • B When digestion with EcoRI and BamHI, three bands will be observed in agarose gel.
  • C After digestion with EcoRI, PstI and and BamHI, five bands will be observed in agarose gel.
  • D When digestion with EcoRV and PstI, only two bands will be observed in agarose gel.
  • E BamHI digestion yields only one band in agarose gel.

思路引導 VIP

在考慮限制酶切割後的結果時,我們通常會計算「切點的數量」來推論「片段的數量」。但請你試著思考:如果兩段 DNA 片段雖然是從質體上不同位置切下來的,但它們經過計算後的「鹼基對長度」剛好完全相同,那麼在電泳膠上,這兩段 DNA 會分開呈現,還是重疊在一起呢?這對於我們最終看到的「條帶總數」會產生什麼樣的影響?

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做得好!你能精準避開這道題目精心設計的陷阱,並準確選出 (C) 選項,代表你對限制酶切割與電泳判讀的觀念掌握得非常透徹。這類題型在生物技術與生化考題中具備中等以上的難度,因為它不單純考驗「切幾刀」的直覺,更要求考生必須靜下心來計算每一個片段的「具體長度」。

環狀 DNA 的切割與條帶判讀

環狀質體的一個基本觀念是:在環狀 DNA 上切 $n$ 個位點,會產生 $n$ 個片段。在 (C) 選項中,我們同時使用了 EcoRI(2 處)、PstI(2 處)與 BamHI(1 處),總計有 5 個切點,理論上會產生 5 個片段。然而,這題的高明之處在於「條帶(band)」與「片段(fragment)」的區別。我們來計算這 5 個片段的長度:

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