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醫療類國考 109年 [醫師] 醫學(一)

第 79 題

雙股DNA melting temperature之定義,是多少百分比的DNA分子產生變性(denaturation)時的溫度?
  • A 25%
  • B 50%
  • C 75%
  • D 100%

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若我們將一個物理狀態的轉變(例如從結合到解離)繪製成一條曲線,當我們要定義一個具代表性的『轉折平衡點』或『中點』時,通常會選擇轉變進度達到整體多少比例的位置?

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  1. 觀念驗證熔解溫度(Melting Temperature, $T_m$) 的定義即為雙股 DNA 達到熱力學平衡的「中點」。在此溫度下,樣品中剛好有 50% 的 DNA 維持雙股結構,另外 50% 則變性(Denaturation)為單股。這也是吸光值($A_{260}$)達到最大增幅一半時的對應溫度。
  2. 難度點評:本題屬於 Easy。這是分子生物學與生物化學的核心基本定義。在臨床實務中,掌握 $T_m$ 是設計 PCR 反應條件與核酸探針的關鍵第一步,也是國考常見的必拿分數。
📝 DNA 熔解溫度 Tm
💡 Tm 指雙股 DNA 達到 50% 變性(解鏈)時的溫度點。
  • Tm 定義:雙股 DNA 分子中有 50% 變性為單股時的絕對溫度值。
  • 增色效應:DNA 變性為單股後,於 260nm 的紫外光吸收值會增加。
  • GC 含量影響:GC 對有三個氫鍵,含量越高則 DNA 越穩定,Tm 越高。
  • 環境因素:鹽離子濃度升高可中和磷酸負電,使 Tm 隨之升高。
🧠 記憶技巧:Tm 是中點,五十變性點;GC 三鍵穩,鹽多溫度升。
⚠️ 常見陷阱:考生常誤以為 Tm 是指 DNA 「全部」變性 (100%) 或「剛開始」變性的溫度。
增色效應 (Hyperchromicity) PCR 引子設計 核酸雜交 (Hybridization)

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