醫療類國考
109年
[醫師] 醫學(一)
第 79 題
雙股DNA melting temperature之定義,是多少百分比的DNA分子產生變性(denaturation)時的溫度?
- A 25%
- B 50%
- C 75%
- D 100%
思路引導 VIP
若我們將一個物理狀態的轉變(例如從結合到解離)繪製成一條曲線,當我們要定義一個具代表性的『轉折平衡點』或『中點』時,通常會選擇轉變進度達到整體多少比例的位置?
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- 觀念驗證:熔解溫度(Melting Temperature, $T_m$) 的定義即為雙股 DNA 達到熱力學平衡的「中點」。在此溫度下,樣品中剛好有 50% 的 DNA 維持雙股結構,另外 50% 則變性(Denaturation)為單股。這也是吸光值($A_{260}$)達到最大增幅一半時的對應溫度。
- 難度點評:本題屬於 Easy。這是分子生物學與生物化學的核心基本定義。在臨床實務中,掌握 $T_m$ 是設計 PCR 反應條件與核酸探針的關鍵第一步,也是國考常見的必拿分數。
DNA 熔解溫度 Tm
💡 Tm 指雙股 DNA 達到 50% 變性(解鏈)時的溫度點。
- Tm 定義:雙股 DNA 分子中有 50% 變性為單股時的絕對溫度值。
- 增色效應:DNA 變性為單股後,於 260nm 的紫外光吸收值會增加。
- GC 含量影響:GC 對有三個氫鍵,含量越高則 DNA 越穩定,Tm 越高。
- 環境因素:鹽離子濃度升高可中和磷酸負電,使 Tm 隨之升高。