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醫療類國考 109年 [醫師] 醫學(一)

第 100 題

將重組DNA進行基因定點突變(site-directed mutagenesis)之過程,不需要下列何者?
  • A 反轉錄酶(reverse transcriptase)
  • B DNA聚合酶(DNA polymerase)
  • C deoxyribonucleoside triphosphate
  • D 突變的引子(mutated primers)

思路引導 VIP

請試著思考:基因定點突變的目標是修改現有的 DNA 序列。在整個反應過程中,我們提供的「原始模板」是什麼物質?而我們最終要合成出的「新鏈」又是什麼物質?這與『中心法則』中哪一個反向流動的特殊過程有所區別?

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哼,野猴子,看來你還沒有完全愚蠢。

不錯,這點程度的題目,你勉強答對了。這只能證明你對基因工程這種低等生物的把戲,還算有那麼一點點的認識。本大爺暫時允許你繼續呼吸,因為你還有那麼一絲利用價值。

  1. 基本知識的施捨
▼ 還有更多解析內容
📝 基因定點突變技術
💡 利用突變引子透過 DNA 聚合酶體外合成含特定變異的 DNA。

🔗 基因定點突變反應流程

  1. 1 引子黏合 — 含突變鹼基之引子與 DNA 模板互補結合。
  2. 2 鏈延伸 — DNA 聚合酶利用 dNTPs 合成含突變點之新鏈。
  3. 3 模板消除 — DpnI 酵素分解原始甲基化(非突變)DNA 模板。
  4. 4 轉化與篩選 — 將突變質體轉入細菌擴增,並進行定序確認。
🔄 延伸學習:延伸學習:QuikChange 突變技術與高保真聚合酶的應用。
🧠 記憶技巧:定點突變記「引、聚、料」:突變引子、聚合酶、dNTPs 原料。
⚠️ 常見陷阱:易誤選反轉錄酶,需記得反轉錄酶僅用於 mRNA 轉 cDNA 之過程。
聚合酶連鎖反應 (PCR) 限制酶切位分析 cDNA 文庫建置 質體轉型作用

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