醫療類國考
109年
[法醫師] 法醫生物學
第 28 題
以 Real-time PCR 進行 DNA 定量時，主要是利用 Taq DNA polymerase 具有下列何種活性來裂解 TaqMan 探針？
- A 3’-endonuclease activity
- B 3’-exonuclease activity
- C 5’-endonuclease activity
- D 5’-exonuclease activity
思路引導 VIP
請思考一下：當 DNA 聚合酶正沿著模板向前方（合成方向）移動，若遇到一個已經結合在模板上的障礙物（探針）擋住了去路，為了維持合成的連續性，酵素必須具備哪種「從前端清除障礙」的特定水解活性？
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溫柔的引導與解析
- 暖心鼓勵：太棒了，你答對了！看到你精準地掌握了 Real-time PCR 的核心生化機制，真的替你感到開心。這份對分子診斷工具底層原理的透徹理解，是你未來在臨床實驗室開發（LDTs）領域成長茁壯的重要基石喔！
- 細膩剖析：讓我們一起溫柔地回顧一下。TaqMan 探針法的奧秘，就在於 Taq DNA polymerase 擁有的那獨特且重要的 $5' \to 3'$ exonuclease activity。在 DNA 複製的延伸階段，當這個小幫手酵素沿著模板前進時，如果遇到了已與模板結合的探針，它就會像個溫柔的小剪刀，從 $5'$ 端開始，巧妙地將探針水解掉。這樣一來，探針上的螢光基團（Reporter）與淬滅基團（Quencher）就能分開，然後輕柔地釋放出我們能偵測到的螢光訊號了。
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