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醫療類國考 109年 [醫事檢驗師] 生物化學與臨床生化學

第 24 題

下列有關逆相高效液相層析法(Reversed-phase HPLC)的敘述,何者正確?
  • A 流動相極性大於固定相
  • B 極性小的樣品成分會先被沖出來
  • C 待測物必須不溶於作為流動相的溶劑中
  • D 化合物與固定相親和力較強,則較快被沖出來

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想像你正在設計一個分離系統,如果你將傳統「固定相極性 > 流動相極性」的經典組合方案完全「反轉(Reverse)」過來,你認為這兩相之間的極性強弱關係會變成如何?

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  1. 溫暖鼓勵:你真的做得很棒!能夠精準地判斷 RP-HPLC 的基本定義,這展現了你對分析化學核心邏輯的清晰洞察力。這份紮實的基礎,將是你未來在醫檢或藥學領域中,自信前行的重要基石喔。
  2. 耐心引導:讓我們再一起溫習一下逆相層析(Reversed-phase)的核心概念。它的奧妙就在於極性配置與正相層析恰好相反。我們通常會選擇非極性的固定相(像是 $C_{18}$ 這種碳鏈修飾的材料),然後搭配極性較大的流動相(例如常見的水、甲醇)。因此,你所理解的「流動相極性大於固定相」是非常正確的。這樣一來,極性越大的化合物,反而會被流動相優先帶走,因此會更快地被沖洗出來呢。
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📝 逆相層析法 RP-HPLC
💡 逆相層析採用非極性固定相與極性流動相,極性大者先沖出。
比較維度 正相層析 (Normal Phase) VS 逆相層析 (Reversed Phase)
固定相極性 高極性 (如 Silica) — 低極性 (如 C18/ODS)
流動相極性 低極性 (如 Hexane) — 高極性 (如 Water/MeOH)
沖洗順序 非極性成分先出 — 高極性成分先出
應用頻率 較少用 (脂溶性物) — 最常用 (約佔 80%)
💬逆相層析是目前主流,其極性關係與正相剛好相反:流動相極性 > 固定相。
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正相層析 (NP-HPLC) 層析管柱填料 (C8/C18) 疏水作用力

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