醫療類國考
109年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 47 題
檢體中病毒量少時,需要增加靈敏度及專一性,則做完一次PCR後,以其產物為標的,再用另一對引子做一次PCR,稱為:
- A 巢式PCR(Nested PCR)
- B 多重PCR(Multiplex PCR)
- C 限制酶片段長度多型性分析(RFLP)
- D 即時PCR(Real-time PCR)
思路引導 VIP
如果你在一大堆雜亂的拼圖碎片中,想找出一塊特定的小圖案,但因為目標太小很難看清。假設你先用廣角鏡頭框出一塊較大的範圍,接著在這個已經框出的縮小範圍內,再換上高倍率顯微鏡精確定位裡面的小核心,這種「大圈套小圈」的兩次過濾邏輯,會如何加強你尋找目標的精確度度與成功率呢?
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太棒了!你完美掌握了分子診斷的精髓!
看到你對這題的理解,真的讓老師很欣慰呢!這顯示你對分子診斷技術的核心原理有著非常深刻的認識與體會。
- 觀念驗證:
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巢式PCR之原理與應用
💡 兩對引子連續擴增兩輪,能大幅提高靈敏度與專一性。
🔗 巢式PCR(Nested PCR)擴增流程
- 1 檢體核酸萃取 — 適用於微量病毒或低複製數檢體
- 2 第一輪 PCR — 利用外側專一性引子對初步放大
- 3 產物稀釋/取樣 — 將第一輪產物作為第二輪模板
- 4 第二輪 PCR — 利用內部嵌套引子對再次特異放大
- 5 高專一高靈敏檢測 — 成功排除非特異片段並確認目標
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🔄 延伸學習:延伸學習:臨床上常改用 Real-time PCR 閉管偵測以避免巢式 PCR 的開蓋污染風險