高考申論題
110年
[農業技術] 作物育種學
第 三 題
📖 題組：
請針對木瓜抗輪點病毒，分別擬定下列三種策略的育種程序。（每小題 10 分，共 30 分）
請針對木瓜抗輪點病毒，分別擬定下列三種策略的育種程序。（每小題 10 分，共 30 分）
📝 此題為申論題，共 3 小題
小題 (三)
基因默化
思路引導 VIP
基因默化通常指 RNA 干擾（RNAi）技術。早期著名的「抗輪點病毒基改木瓜」即利用此原理（鞘蛋白 Coat Protein, CP 基因誘導的抗性）。思考路徑：1. 構築雙股 RNA（dsRNA）或髮夾型 RNA（hpRNA）載體。2. 針對病毒關鍵基因序列。3. 轉殖與穩定表現。4. 誘導宿主 RNAi 機制降解進入的病毒基因。
小題 (一)
分子輔助雜交育種
思路引導 VIP
本題重點在於「分子輔助」與「雜交育種（回交）」的結合。木瓜輪點病毒（PRSV）抗性通常來自野生種或特定品種。思考路徑：1. 選擇親本（抗病供體與優良感病受體）。2. 建立雜交世代。3. 利用分子標記進行「前景選拔」（選抗病基因）與「背景選拔」（加速回交親本基因回復）。4. 重點描述回交程序（Backcross）如何縮短育種年限。
小題 (二)
基因編輯
思路引導 VIP
基因編輯（如 CRISPR/Cas9）是當前顯學。思考路徑：1. 目標基因鑑定（例如敲除病毒進入細胞所需的 eIF4E 因子或 S-gene）。2. 載體建構。3. 轉導木瓜組織（癒合組織）。4. 再生植株。5. 篩選與去基因轉殖（DNA-free）處理。
木瓜基因默化育種
💡 利用 RNAi 機制，誘導植物降解同源病毒 RNA 以獲得抗病性。
🔗 RNAi 抗病育種五大程序
- 1 序列與載體 — 選病毒 CP 基因構築 hpRNA 表現載體
- 2 基因轉殖 — 以農桿菌轉殖法導入木瓜並行組織培養
- 3 分子鑑定 — 檢測基因嵌入（DNA）與 siRNA 表現量
- 4 抗病接種 — 田間人工接種試驗確認其抗病表現
- 5 安全評估 — 完成基改風險評估後申請上市許可
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🔄 延伸學習：延伸學習：了解不同病毒株系間的序列同源性對 RNAi 抗病廣度的影響。
