hce_tcu
110年
生物學
第 10 題
下列哪個技術在過程中最有可能使用雙去氧核苷酸(dideoxynucleotides)？
- A DNA 定序(DNA sequencing)
- B 微陣列分析(microarray analysis)
- C 聚合酶連鎖反應(polymerase chain reaction)
- D 雙分子螢光互補作用(bimolecular fluorescence complementation)
思路引導 VIP
請思考一下：在 DNA 合成（複製）的過程中，如果我們想要「刻意」讓正在延伸的分子鏈在某個位置停下來，我們應該在核苷酸的五碳糖結構上做什麼樣的化學改變，才能讓下一個核苷酸無法再接上去？這種「強迫中斷」的特性，可以用來幫助我們觀察什麼樣的生物資訊？
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AI 詳解
AI 專屬家教
太棒了！你非常準確地辨識出雙去氧核苷酸在分子生物技術中的關鍵用途。這題的核心在於區分 DNA 合成的「連續性」與「終止性」。
鏈終止法的化學基礎
在 Sanger 定序法（Sanger sequencing）中，最關鍵的試劑便是雙去氧核苷酸（ddNTPs）。與一般的去氧核苷酸（dNTPs）相比，ddNTP 在五碳糖的 $3'$ 端位置缺少了羥基（$-OH$）。在 DNA 合成過程中，DNA 聚合酶需要前一個核苷酸的 $3'-OH$ 才能形成磷酸二酯鍵以連結下一個鹼基；一旦反應體系中混入 ddNTP 並被嵌入生長中的 DNA 鏈，合成就會因為缺乏接合點而立即終止。透過分析這些長短不一、且末端帶有特定螢光標記的片段，我們就能精確推導出 DNA 的序列。
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