調查局三等申論題
110年
[醫學鑑識組] 分子生物學
第 一 題
📖 題組：
一、
一、
📝 此題為申論題，共 2 小題
小題 (一)
(一)請敘述第一型及第二型拓撲異構酶（Type I 及 Type II Topoisomerase）的作用機制及其在細胞內參與的反應。（20 分）
思路引導 VIP
看到此題，應立即聯想「單股與雙股斷裂」及「是否消耗 ATP」兩大核心差異。作答時需依序條列兩者的催化機制（強調 Tyrosine 殘基與共價中間物），接著說明其在複製與轉錄過程中的具體生理功能，最後強烈建議以表格進行綜合比較，以凸顯邏輯與全面性，爭取閱卷委員的青睞。
小題 (二)
(二)如果你已經純化一個全長為 10kb 的共價閉合環狀 DNA（covalently closed circular DNA）質體，然後分別以下表的最適反應條件處理後，跑電泳分析。請畫出三種條件跑出的電泳圖型。（6 分）
加入的酵素 作用條件
1 Type I topoisomerase 37℃，一小時
2 DNase I 37℃，5 分鐘
3 緩衝液 37℃，一小時
思路引導 VIP
考生應先分析三種處理條件對共價閉合環狀 DNA（cccDNA）拓樸結構（Topology）的影響，釐清其產生之構型轉換（如超螺旋、鬆弛型、線型）。接著運用電泳原理，根據不同 DNA 構型在膠體中受到的孔徑阻力差異（遷移率：Supercoiled > Linear > Relaxed/Open circular），精確推斷並繪製出各條件的電泳條帶相對位置。