調查局三等申論題
110年
[醫學鑑識組] 分子生物學
第 一 題
📖 題組：
四、新冠肺炎病毒的確認檢測方法為即時聚合酶鏈式反應（Real-time polymerase chain reaction）。
四、新冠肺炎病毒的確認檢測方法為即時聚合酶鏈式反應（Real-time polymerase chain reaction）。
📝 此題為申論題，共 3 小題
小題 (一)
(一)請敘述其原理。（10 分）
思路引導 VIP
看到本題應先聯想新冠病毒為RNA病毒，故須先闡述「反轉錄（Reverse transcription）」將RNA轉為cDNA的步驟。接著論述「即時（Real-time）」的核心機制，即利用螢光探針（如TaqMan probe）配合PCR擴增，達到邊擴增、邊釋放螢光訊號的即時偵測效果，最後必須點出外切酶活性機制與Ct值（Cycle threshold）的定義及判定意義。
小題 (二)
(二)相較於一般 PCR 反應，即時聚合酶鏈式反應的優點為何？（8 分）
思路引導 VIP
面對比較類型的題目，首要策略是採用「表格法」搭配「條列式說明」以呈現邏輯對比。本題應從擴增動力學（指數期與終點）、偵測機制（螢光與電泳）、靈敏度、操作流程與污染風險等維度，精準切入即時聚合酶鏈式反應（Real-time PCR）的優勢。
小題 (三)
(三)所謂的 Ct 值的定義為何？（8 分）
思路引導 VIP
看到「Ct 值」應立即聯想 Real-time PCR 的擴增曲線與螢光信號。作答時需包含三大得分要素：(1) 英文全稱與精確定義（螢光達到閾值所需的循環數）、(2) 動力學機制（與初始模板量的對數反比關係）、(3) 臨床與生物學意義（病毒載量與傳染力的指標）。