調查局三等申論題
110年
[醫學鑑識組] 生物化學
第 一 題
一、二維膠體電泳（2D gel electrophoresis）主要用途在於分析複雜蛋白質樣品，請說明其原理與步驟。（20 分）
📝 此題為申論題
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看到「二維膠體電泳」，應立即聯想到這是結合「等電焦集電泳（IEF）」與「SDS-PAGE」的高解析度蛋白質分離技術。答題時務必分層次論述：第一維依等電點（pI）分離、第二維依分子量（MW）分離，並詳細寫出各步驟中添加的關鍵試劑（如SDS、還原劑）之生化作用機制。
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【破題】二維膠體電泳（Two-dimensional gel electrophoresis, 2D-PAGE）是一種利用蛋白質兩種獨立的物理化學特性（等電點與分子量）進行正交分離（orthogonal separation）的高解析度技術，為蛋白質體學（Proteomics）分析複雜混合物的重要工具。 【論述】 一、 第一維分析：等電焦集電泳（Isoelectric Focusing, IEF）
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二維膠體電泳（2D gel electrophoresis）結合「等電焦集電泳（IEF）」與「SDS-PAGE」，跟Two-dimensional electrophoresis一樣嗎?
二維膠體電泳分析
💡 利用蛋白質等電點與分子量之正交特性進行高解析分離技術。
| 比較維度 | 第一維 (IEF) | VS | 第二維 (SDS-PAGE) |
|---|---|---|---|
| 分離依據 | 等電點 (pI) | — | 分子量 (MW) |
| 蛋白質電荷 | 保留原生淨電荷 | — | 由 SDS 賦予均勻負電荷 |
| 關鍵材料 | IPG 膠條、尿素、CHAPS | — | 聚丙烯醯胺凝膠、SDS |
| 功能用途 | 依化學性質初步定位 | — | 依物理體積最終分離 |
💬兩者採正交分離技術，可在一片膠體上解析出數千個蛋白質點。
