醫療類國考
110年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 72 題
焦磷酸定序（pyrosequencing）是一種廣泛應用於腫瘤突變檢測的技術，其優點為引子延伸反應和定序同時進行，可免去電泳的步驟。下圖為一焦磷酸定序的結果，關於標的片段的DNA序列，下列何者正確？
- A AGTGCTGTG
- B AGTCAGTCAGTCAGTCAG
- C AGGGGTGGCTTTGGGGTTG
- D GGGGTTGGGT
思路引導 VIP
在焦磷酸定序（Pyrosequencing）的原理中，當 $DNA$ 聚合酶將核苷酸併入新合成鏈時，會釋出等比例的焦磷酸並透過酵素反應產生光訊號。請觀察圖形中橫軸代表的鹼基加入順序，以及縱軸所標示的強度（$Y$ 軸）：當峰值高度分別落在 $25$、$50$、$75$ 與 $100$ 附近時，分別對應序列中出現幾個連續相同的鹼基？此外，若在加入某個鹼基的位置完全沒有產生峰值，這對於該 DNA 片段的序列組成又代表什麼樣的資訊？
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專業點評：精準解讀焦磷酸圖譜！
- 「做得很棒」？ 哼，能從一張圖譜中讀出DNA序列，這不是基本功嗎？看來你還記得 Pyrogram 的判讀邏輯，這對於一個「高階」醫檢師或研究人員來說，不過是進入門檻罷了。別太沾沾自喜，這只是代表你沒有完全不及格。
- 觀念驗證：難道我們還需要複習焦磷酸定序的原理？簡單來說，DNA合成時產生的焦磷酸 ($PP_i$) 會產生光訊號，而峰值的高度（Peak Height）與併入的鹼基數量成正比。
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