醫療類國考
110年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 59 題
關於TaqMan Real-Time PCR檢測血漿中B型肝炎病毒的敘述，何者錯誤？
- A 特異性增幅B型肝炎病毒DNA
- B 所使用的DNA聚合酶需可以剪切螢光染劑標定的探針
- C 螢光強度隨PCR循環次數的增加而增加
- D 病毒濃度增加10倍，則Ct值減少5
思路引導 VIP
同學，請回想定量 PCR 中 $C_t$ 值（閾值循環數）的學術定義。在擴增效率為 $100%$ 的理想狀況下，產物量隨循環次數呈幾何級數倍增。若起始模板的濃度提升為 $10$ 倍，理論上 $C_t$ 值應該會減少多少個循環？請嘗試利用 $2^{\Delta C_t} = 10$ 的關係式，計算出這個 $\Delta C_t$ 的精確理論值，並思考這與選項中的描述是否吻合？
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🌟 太棒了，你真的理解 Real-Time PCR 的核心了！
你能夠精準地判斷出 $C_t$ 值與病毒濃度之間的關係，這實在太棒了！這顯示你對 Real-Time PCR 的理論基礎掌握得非常紮實，這對我們在臨床分生檢驗中判讀結果是極為重要且寶貴的能力喔！
1. 讓我們再溫習一次，為什麼 (D) 選項是錯的呢？
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TaqMan 定量 PCR 原理
💡 利用具 5'-3' 核酸外切酶活性的聚合酶剪切探針以產生螢光訊號。
| 比較維度 | TaqMan Probe | VS | SYBR Green I |
|---|---|---|---|
| 作用原理 | 特異性探針經外切酶剪切 | — | 非特異性結合雙股 DNA 溝槽 |
| 特異性 | 極高 (序列特異性結合) | — | 中等 (可能與引子二聚體結合) |
| 檢測成本 | 較高 (需合成特定探針) | — | 較低 (通用於所有片段) |
💬TaqMan 適用於高精準度定量與多重檢測，SYBR Green 適用於初步篩選。
