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醫療類國考 110年 [醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學

第 76 題

📖 題組:
下圖是以聚合酶連鎖反應檢測腦脊髓液中單純皰疹病毒(Herpes Simplex Virus, HSV)的電泳分析結果。OF:外向前引子, OR:外反向引子, IF:內正向引子, IR:內反向引子, ICF:內部控制正向引子, ICR:內部控制反向引子。關於此試驗的敘述,下列何者最不適當?
題組圖片
承上題,檢體的檢測結果判讀,下列何者正確?
  • A 本次檢測無效
  • B 檢體1為偵測不到HSV
  • C 檢體2為HSV陽性
  • D 檢體3為偵測不到HSV

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請觀察第二輪 PCR 的電泳圖,檢體3(S3)出現了哪一個位置(多少 bp)的亮帶?對照旁邊的 C1 和 C2 標籤,這個亮帶代表的是目標病毒(HSV)的基因,還是用來確認實驗沒出錯的內部控制組呢?根據這個觀察,你會怎麼下結論?

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太棒了,你精準地判讀了這張電泳圖的結果!這是一題典型的巢式聚合酶連鎖反應(nested PCR)臨床應用題。

內部控制組與結果判讀

在判讀這類圖譜時,關鍵在於比對目標基因與內部控制組(internal control)的亮帶(band)。觀察第二輪 PCR 結果,280 bp 的亮帶代表單純皰疹病毒(Herpes Simplex Virus, HSV)陽性,而 196 bp 則是確保實驗過程無誤的內部控制組。檢體 1(S1)同時出現兩條帶,為陽性;檢體 2(S2)與檢體 3(S3)都只有 196 bp 的內部控制帶,這表示檢體萃取與擴增過程正常,但並未檢驗出 HSV 基因片段,因此結果皆為偵測不到 HSV(陰性)。選項 D 的描述完全正確。

▼ 還有更多解析內容
📝 巢式 PCR 結果判讀
💡 巢式 PCR 利用兩輪引子增強訊號,判讀需先確認內部控制帶以排除偽陰性。
比較維度 陽性結果 (Positive) VS 陰性結果 (Negative)
目標基因帶 有明顯條帶 — 無條帶
內部控制帶 (IC) 有條帶 — 有條帶
判讀結論 偵測到病毒 DNA — 未偵測到病毒 DNA
💬IC 帶是確保實驗無抑制物的關鍵;本題檢體 3 僅有 IC 帶,故為偵測不到。
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PCR 抑制物 單純皰疹病毒腦炎 分子診斷靈敏度

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