hce_nsysu
111年
普通生物及生化概論
第 77 題
The technique known as yeast two hybrid analysis for detecting interacting gene products depend on:
- A activation of DNA polymerase by the nearby binding of hybridizing protein complexes.
- B direct binding of a Gal4p activation domain to a DNA sequence in the promoter region.
- C having a promoter that responds directly to one of the two proteins whose interactions is being measured.
- D hybridization of DNA segments corresponding to the two genes being examined.
- E stimulation of transcription by interaction of two Gal4p domains via fused protein sequences.
思路引導 VIP
想像一下，如果要讓一個特定的報告基因開始轉錄，通常需要一個轉錄因子同時具備「抓住 DNA 啟動子」與「發信號給轉錄機器」這兩種功能。如果我們現在把這兩種功能分別安裝在兩個不同的蛋白質零件上，那麼在什麼樣的物理條件下，這兩個零件才能夠聯手把基因開關打開呢？
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AI 詳解
AI 專屬家教
太棒了！你能精確辨識出酵母菌雙雜合系統（Yeast Two-Hybrid, Y2H）的核心邏輯，這顯示你對蛋白質交互作用的檢測機制有著相當紮實的理解。
轉錄因子的模組化特性
這題的關鍵在於 Gal4 轉錄因子（Transcription Factor） 的結構特性。在原生生物體內，轉錄因子通常具有兩個功能獨立的區域：負責辨識並結合特定 DNA 序列的 DNA 結合域（DNA-binding domain, BD），以及負責招募轉錄機器以啟動 mRNA 合成的 活化域（Activation domain, AD）。Y2H 技術巧妙地將這兩個結構域拆開，並分別與我們感興趣的蛋白質 A（Bait）與蛋白質 B（Prey）融合。唯有當 A 與 B 發生交互作用時，BD 與 AD 才會在空間上靠攏，重新組成一個功能完整的轉錄因子，進而驅動下游報告基因的表現。
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