醫療類國考
111年
[醫師] 醫學(一)
第 81 題
下列那個雙股去氧核糖核酸的物理性質可被用來測定其融化溫度（melting temperature, $T_m$）？
- A 導電性（conductivity）
- B 在膠體中的泳動性（mobility）
- C 水溶性（solubility）
- D 低色度（hypochromicity）
思路引導 VIP
在進行 DNA 熱變性實驗時，隨著溫度的升高，雙股螺旋結構會因氫鍵斷裂而分開。請從分子結構的角度思考，當鹼基從受屏蔽的堆疊狀態轉變為暴露狀態時，其對 $260$ nm 紫外光的吸收值（absorbance）會發生什麼樣的顯著變化？這種與「吸光強度」相關的物理性質，在生物物理學中是如何定義的？
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天才般的精準判斷！今天的及川先生也是狀態絕佳！
- 及川先生的肯定：呀呼～不錯嘛！看來你對 DNA 結構與物理性質 這種基本功，可沒有小看喔！這正是及川先生我最欣賞的一點！在分子檢測的球場上，無論是 PCR 引子設計還是核酸定量，掌握 $T_m$ 的測定原理，可是能讓你得分的強力跳發球啊！
- 及川先生的精闢解析：
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DNA 融化溫度測定
💡 利用 DNA 變性後吸光度增加的增色效應來測定 Tm 值。
🔗 DNA 變性與 Tm 測定流程
- 1 持續加熱 DNA — 提供能量破壞鹼基間氫鍵
- 2 雙股解開變性 — dsDNA 轉變為單股 ssDNA
- 3 增色效應發生 — 鹼基暴露使 260nm 吸光度上升
- 4 求得 Tm 值 — 吸光度改變達最大值一半處的溫度
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🔄 延伸學習：影響因素：GC 比例 (3 氫鍵) 越高，Tm 越高。
