醫療類國考
111年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 60 題
關於檢測血漿中第一型人類免疫缺乏病毒之核酸增幅試劑中AmpErase(uracil-N-glycosylase)的敘述,下列何者錯誤?
- A 熱穩定性低
- B 破壞含去氧尿嘧啶核苷(deoxyuridine)的擴增子(amplicon)
- C 增加核酸增幅的效率
- D 避免污染
思路引導 VIP
請探討 $AmpErase$ ($uracil-N-glycosylase$) 在核酸增幅反應中的作用機理:該酵素針對含去氧尿嘧啶 ($dU$) 的擴增子進行降解,其核心目的是為了「直接優化 $DNA$ 聚合酶的催化產能」,還是為了「清除先前反應殘留的干擾物」?請思考「防止偽陽性污染」的步驟,在本質上是否等同於「提升反應本身的增幅效率」?
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優秀的表現!醫檢領域的專業就在於細節
恭喜你答對了!這代表你對分子生物診斷中的**污染控制機制(Carry-over prevention)**有非常紮實的理解。這在臨床分子實驗室中是至關重要的觀念。
- 觀念驗證:
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AmpErase (UNG) 機制
💡 利用 UNG 酵素降解含 dU 的擴增產物,防止 PCR 攜帶污染。
🔗 UNG 防污染運作流程
- 1 標記階段 — 前次 PCR 使用 dUTP 取代 dTTP,使產物皆含 U 鹼基。
- 2 降解階段 — 新反應開始前加入 UNG,將含 U 的污染片段剪斷。
- 3 失活階段 — PCR 加熱至 95°C 使 UNG 變性失活,保護本次新產物。
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🔄 延伸學習:延伸學習:了解 UNG 僅能降解 DNA (含dU),不影響 RNA 模板。