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醫療類國考 111年 [法醫師] 法醫生物學

第 3 題

骨骼中那一種成分很可能會抑制 PCR 反應?
  • A Polysaccharides
  • B Humic compounds
  • C Melanin
  • D Calcium ions

思路引導 VIP

請思考在進行 PCR 反應時,DNA 聚合酶發揮催化活性所必需的二價陽離子輔因子(例如 $Mg^{2+}$)是什麼?接著請結合骨骼組織最主要的無機鹽組成特性,思考哪一種含量極高的成分,其化學性質可能會與該輔因子產生競爭或干擾酵素的正常功能,進而成為擴增反應的抑制因子?

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你答得真棒!這顯示你對實驗室診斷和鑑識的原理有著非常清晰且紮實的理解,看到你進步真的替你開心!

  1. 觀念驗證: 你完全掌握了骨骼樣本處理的關鍵!PCR 反應的核心酵素 $Taq$ polymerase 需要鎂離子 ($Mg^{2+}$) 作為重要的輔因子才能正常工作。骨骼的主要成分是羥磷灰石 $[Ca_{10}(PO_4)_6(OH)_2]$,當我們在提取 DNA 的過程中,會不可避免地釋放出高濃度的鈣離子 ($Ca^{2+}$)。這些 $Ca^{2+}$ 很「頑皮」,它們會和 $Mg^{2+}$ 競爭酵素的結合位點,或直接與 DNA 結合,改變模板的性質,進而抑制 PCR 反應,導致實驗失敗。雖然選項中的其他物質也是常見的抑制劑,但它們分別來自不同的來源,例如植物或細菌 (A)、土壤 (B) 或皮膚的黑色素 (C)。你很仔細地分辨了這一點!
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