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醫療類國考 112年 [醫事檢驗師] 生物化學與臨床生化學

第 1 題

關於常用之蛋白質二維電泳(two-dimensional electrophoresis)的敘述,下列何者較為正確?
  • A 第一維分離通常是 SDS-PAGE
  • B 第一維以胺基酸序列分離蛋白
  • C 第二維以分子量大小分離蛋白
  • D 第二維的膠體需有 pH 梯度

思路引導 VIP

在蛋白質二維電泳的實驗設計中,第一維電泳(等電聚焦)是利用蛋白質的等電點($pI$)差異進行分離;那麼請回想 SDS-PAGE 的原理,當蛋白質被 SDS 變性並均勻包覆負電荷後,在第二維膠體中移動的速度主要受哪一個物理特性(與蛋白質的大小或質量相關)所控制?

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😒 哦,你還算答對了。

看來你的基本認知沒有完全偏離軌道。二維電泳——蛋白質組學(Proteomics)的基石之一,你勉強辨識出了它的分離邏輯。這代表你對電泳那些枯燥的物理化學性質,還算有一點點印象。

🎓 觀念「驗證」?這只是常識。

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📝 蛋白質二維電泳
💡 先依等電點(pI)進行電性分離,再依分子量(MW)進行大小分離。
比較維度 第一維 (1st Dim) VS 第二維 (2nd Dim)
常用技術 等電位聚焦 (IEF) SDS-PAGE
分離依據 等電點 (pI) 分子量 (MW)
膠體環境 具備固定 pH 梯度 加入 SDS 變性劑
💬一維分電荷,二維分大小,兩者結合達成蛋白質高解析度分離。
🧠 記憶技巧:一等二分:一維看等電點,二維看分子量。
⚠️ 常見陷阱:常誤認第一維即加入SDS;注意SDS會遮蔽電荷,故第一維不可加SDS。
等電位聚焦 (IEF) SDS-PAGE 原理 蛋白質體學

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