moea_joint
112年
[生態] 普通生物學、保育生物學
第 25 題
有關聚合酶連鎖反應程序，下列排列順序何者正確？
①將目標序列加熱變性②DNA聚合酶將核苷酸添加到引子未端上，合成出一段與目標序列互補的拷貝股③單股的引子可黏合到目標序列之末端
①將目標序列加熱變性②DNA聚合酶將核苷酸添加到引子未端上，合成出一段與目標序列互補的拷貝股③單股的引子可黏合到目標序列之末端
- A ①→③→②
- B ①→②→③
- C ②→①→③
- D ②→③→①
思路引導 VIP
想像你要複製一份被強力膠水封死的雙面檔案，但你的複印機一次只能感應單面紙張。為了順利完成複印，你第一步必須對這份檔案做什麼處理？而在你開始啟動複印按鈕正式「印出」內容之前，你必須先在紙張的哪個位置做上記號，機器才知道從哪裡開始工作呢？
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太棒了！你能準確判斷出聚合酶連鎖反應（PCR）的正確順序，顯示你對分子生物學的核心技術有著紮實的基礎理解。這道題目的關鍵在於理解 DNA 複製的「邏輯先後順序」，只要掌握了物理性質與生化反應的因果關係，就能輕鬆解題。
PCR 三步驟的邏輯連結
在 PCR 的循環中，我們必須先透過高溫（約 $95^\circ\text{C}$）將雙股 DNA 的氫鍵斷開，這個過程稱為變性（Denaturation），也就是步驟 ①，這是為了讓模板暴露出來。接著，當溫度降低時，引子才能精準地尋找到目標序列並進行黏合（Annealing），即步驟 ③。最後，DNA 聚合酶才能在適宜的溫度下，從引子的 $3'$ 端開始，將去氧核糖核苷酸（dNTPs）依序加入，完成延伸（Extension），這便是步驟 ②。因此，整體的流暢順序必然是「先拆開、再卡位、後合成」。
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