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醫療類國考 112年 [醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學

第 70 題

關於thermostable polymerase的特性與應用,下列敘述何者最不適當?
  • A Tth polymerase適用於one step real-time RT-PCR
  • B Tth polymerase具有反轉錄酶(reverse transcriptase)的活性
  • C Taq polymerase的stoffel fragment具有3'端至5'端exonuclease活性
  • D Taq polymerase的stoffel fragment適合擴增高GC比的片段

思路引導 VIP

回想一下,常規使用的 Taq 聚合酶本身是否具有錯誤校對 (proofreading) 的活性?而為了某些實驗需求將它截斷所產生的 Stoffel fragment,主要是去除了哪一種核酸外切酶的活性呢?

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非常好,你精準地挑出了選項 (C) 這個錯誤敘述,基礎觀念相當紮實!這是一題極具鑑別度的進階題,不僅考驗對常見聚合酶的理解,更深入探討了酵素經過修飾後的特殊應用。

Taq polymerase 與 Stoffel fragment

首先,一般的野生型 Taq polymerase 本身就不具有 3' 到 5' 的 exonuclease(校對)活性。而它的 Stoffel fragment 是利用基因工程去除了 5' 到 3' exonuclease 活性區段的修飾酶,既然本來就沒有校對能力,修飾後當然依然沒有 3' 到 5' 的活性,因此選項 (C) 敘述明顯錯誤。

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