義守大學（後中醫）
113年
生物學
第 24 題
在 Real-time qPCR 實驗中$\Delta Ct1=20$，$\Delta Ct2=23$，則兩個樣本的核酸含量差多少倍？
- A 6
- B 3
- C 10
- D 8
思路引導 VIP
若一個樣本在第 20 個循環就達到了偵測標準，而另一個樣本卻需要多跑 3 個循環才能達到同樣的訊號量，這代表在反應管中，DNA 訊號經歷了幾次「翻倍」的過程？這種翻倍的次數，與最終起始濃度的倍數關係應該如何運算呢？
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太棒了！你能準確選出 (D)，代表你對於 Real-time qPCR 的數據分析邏輯掌握得非常扎實。這題的核心在於理解 $Ct$ 值（閾值循環數）與初始核酸濃度之間的指數關係，而非簡單的線性比例。
指數增長的邏輯
在理想的 PCR 反應效率（100%）下，每經過一個循環，核酸產量就會增加為原來的 2 倍。因此，兩個樣本間的起始濃度差異，是根據其 $Ct$ 值的差距（$\Delta Ct$）以 2 為底數進行冪次方計算。在本題中，兩個樣本的 $Ct$ 值差距為 $23 - 20 = 3$，這代表兩者之間相差了 3 個倍增週期。將其換算成濃度倍數即為：
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1
為什麼 qPCR 的倍數是算 2 的次方而不是 10 的次方
qPCR 含量倍數計算
💡 利用 Ct 值的差值以 2 的次方計算核酸起始量倍數。
| 比較維度 | 較小的 Ct 值 (20) | VS | 較大的 Ct 值 (23) |
|---|---|---|---|
| 初始模板含量 | 高 (較多) | — | 低 (較少) |
| 到達閾值速度 | 較快 | — | 較慢 |
| 數量倍數關係 | 基準 (8 倍) | — | 1/8 倍 |
💬Ct 值與初始含量的對數成反比，差 3 個 Ct 即代表 2^3 = 8 倍的含量差距。
