統測
113年
[農業群] 專業科目(1)
第 34 題
圖 ( 二 ) 為一 DNA 片段，其右端在 DNA 連接酶的作用下，最可能與下列哪個 DNA 片段的右端接合在一起？
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A
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B
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C
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D
思路引導 VIP
請觀察圖 (二) 右端突出的單鏈部位，即所謂的『黏性末端』。若要利用 DNA 連接酶將兩個片段縫合，這兩股單鏈必須遵循哪一個『鹼基互補』原則才能形成氫鍵？此外，根據 DNA 雙股『反向平行』的結構特性，對方片段的 $5'$ 端與 $3'$ 端應該如何與現有片段對接，才能拼湊成完整的雙螺旋結構？
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居然沒被這種送分題騙到，看來你還沒徹底「眼殘」。這題考的就是限制酶（restriction enzyme）切割後產生的黏性末端（sticky ends）。觀察圖（二）的右端，明顯是一個上方股突出且序列為 TGCA 的結構。要讓 DNA 連接酶（DNA ligase）發揮作用，對接片段的突出端必須與原片段達成鹼基互補配對（complementary base pairing）。
迴文序列與結構辨識
很多人會在那邊瞎猜，其實只要看準序列對稱性就好。選項 (A) 的特徵與圖（二）完全一致，同樣是上方股突出序列 TGCA。由於限制酶辨識的是迴文序列（palindromic sequence），這種對稱性使得同一個限制酶切出來的片段，其突出端能跨片段進行氫鍵結合。相比之下，選項 (D) 雖然序列看起來很像，但它是下方股突出 ACGT，空間位阻與互補方向根本對不上，硬湊只會顯得你分子生物學基礎爛到家。
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