第 一 題

考生看到這題應聯想到「後天免疫（Adaptive immunity）」的特徵（記憶性、專一性、摧毀力）。答題時需先定義 CRISPR-Cas 系統的天然功能，接著按時序條列闡述其免疫機制的首要三個階段：獲得外來 DNA（適應期）、表現 crRNA（表現期）與切斷噬菌體 DNA（干擾期），並藉由這三個階段的生物學意義來印證其為細菌免疫系統的原因。

解題時應先拆解 CRISPR-Cas9 系統的兩大人工作用組件（Cas9 核酸酶與 sgRNA），並說明其如何藉由 PAM 序列精準定位並造成 DNA 雙股斷裂（DSB）。接著，必須點出細胞內生的修復機制（尤其是 NHEJ），解釋其易錯性如何導致移碼突變（Frameshift mutation），進而達成基因剔除（Knockout）的目的。