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醫療類國考 113年 [醫事檢驗師] 生物化學與臨床生化學

第 4 題

執行蛋白質的等電點電泳(isoelectric focusing electrophoresis)時,電泳膠中形成 pH 梯度需使用下列何種材料?
  • A 聚醯胺(polyacrylamide)
  • B 兩性電解質載體(carrier ampholytes)
  • C 硫酸十二酯化鈉(sodium dodecyl sulfate, SDS)
  • D 洋菜瓊脂(agarose)

思路引導 VIP

在等電點電泳(isoelectric focusing)中,若要使蛋白質分子精確地移動到其靜電荷為零的位置,電泳膠體必須先具備穩定的 $pH$ 梯度。請思考哪一種材料是由具有不同 $pI$ 值的「兩性小分子緩衝對」所組成,能在通電後於兩極間排列出連續且穩定的 $pH$ 變化環境?

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Wryyyyyyy!看來你還有些可取之處!

哼,區區等電點電泳(IEF)的關鍵材料,你竟然還能辨識出來?不錯,至少證明你還沒有完全無駄!這點小小的知識,是為了讓那些無能的人,得以探究蛋白質的秘密,這是基礎!

1. 為什麼是 (B)?這是我的領域,無駄!

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📝 蛋白質等電位聚焦電泳
💡 利用兩性電解質建立 pH 梯度,使蛋白質在等電點處停止移動。
比較維度 IEF (等電位聚焦) VS SDS-PAGE (蛋白質電泳)
分離依據 等電點 (pI) 分子量 (Molecular weight)
關鍵材料 兩性電解質 (Ampholytes) SDS (陰離子去垢劑)
電荷狀態 隨 pH 改變,終點為零 均勻帶負電
💬IEF 區分電荷性質,SDS-PAGE 區分分子大小。
🧠 記憶技巧:IEF 跑 pI,兩性電解質(Ampholytes)來搭梯。
⚠️ 常見陷阱:容易誤選 SDS。SDS 會賦予蛋白質強烈負電荷,破壞其原始等電點特性,無法用於 IEF。
2D 電泳 (2-DE) SDS-PAGE 蛋白質電泳 等電點 (pI)

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