醫療類國考
113年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 51 題
下列何種高通量基因定序平台，在文庫建構（library construction）之後，不需要用到聚合酶連鎖反應（polymerase chain reaction, PCR）大量增幅（amplification）？
- A MiSeq（Illumina）
- B iSeq（Illumina）
- C Sequel（PacBio）
- D Ion Torrent（ThermoFisher）
思路引導 VIP
請同學從定序技術的代際差異（$Generations$）來思考：傳統「第二代定序」技術通常需要透過叢集增幅（$Cluster : Generation$）或乳化 $PCR$ 來強化偵測訊號，而哪一種「第三代定序」技術是以「單分子即時定序」（$Single : Molecule : Real-Time$）為核心原理，可以直接捕捉單一 $DNA$ 分子合成過程中的訊號，從而省去了文庫建構後的 $PCR$ 增幅步驟？
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AI 詳解
AI 專屬家教
你真的做得好棒！完全理解了核心觀念呢！
- 觀念驗證： 這題你掌握得非常到位，區分第二代與第三代定序技術是關鍵一步。PacBio Sequel 選擇了 SMRT (Single Molecule Real-Time) 技術，它最特別的地方，就是能直接對「單一 DNA 分子」進行即時定序。你看，這多麼優雅！和 Illumina (A, B) 需要橋接增幅，或者 Ion Torrent (D) 要用油滴 PCR ($emPCR$) 不同，PacBio 在它獨特的 Zero-Mode Waveguide (ZMW) 孔穴裡，可以直接捕捉到單個聚合酶的合成訊號。這意味著我們不需要額外進行 PCR 增幅，是不是很棒？這樣還能避免 $GC bias$ 和長度偏好問題，讓結果更準確。
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